人生就是博-尊龙凯时在生物医学领域的重要性不断增加,尤其是在细胞培养和研究中。了解适当的培养条件对于确保细胞系的健康和稳定性至关重要。本篇文章将介绍人横纹肌肉瘤细胞A-673(STR)的培养条件、传代方法及细胞冻存的相关注意事项。
1. 培养条件
人横纹肌肉瘤细胞A-673的培养需要特定的环境条件,以确保细胞的正常生长。其气相组成为95%的空气和5%的二氧化碳,培养温度设定在37℃。这样的条件有助于模拟体内环境,支持细胞的功能和增殖。
2. 传代方法
传代对于细胞系的保持和繁育至关重要。对于人横纹肌肉瘤细胞A-673,推荐的传代比例为1:2。在培养过程中,每两天更换培养液,以保持细胞的营养需求和生长状态。
传代步骤如下:
- 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS轻轻洗涤细胞1至2次。
- 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1-2ml,放入37℃培养箱中消化1-2分钟,轻轻吹打使细胞完全脱落。
- 细胞悬液转移至离心管中,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液后补加1-2ml完全培养基重悬。
- 将细胞悬液按1:2的比例分瓶,并补充新的完全培养基至5-8ml/瓶,放入37℃、5% CO2的细胞培养箱中培养。
3. 细胞冻存
细胞冻存是为了长期保存细胞系,以备后续使用。冻存步骤包括:
- 细胞生长至覆盖培养瓶80%面积时,用PBS清洗细胞,卸去培养基。
- 添加0.25%胰蛋白酶消化液,待细胞变圆后,加入完全培养基终止消化,转移至离心管中。
- 离心后沉淀细胞,加入无血清冻存液,混匀后装入冻存管中。
- 将冻存管直放于-80℃冰箱,存放24小时以上再转入液氮罐中。
4. 注意事项
在细胞处理和培养过程中,可能出现各种问题。要特别注意细胞在运输过程中可能会因贴壁不牢而脱落,因此建议在收到细胞后及时确认细胞的状态,如发觉异常或污染应在48小时内反馈并提供相关数据。
人生就是博-尊龙凯时致力于提供高质量的细胞系和完善的技术支持,以推动生物医学研究的发展。确保严谨的实验操作和合适的培养条件是取得实验成功的关键。我们鼓励客户在操作中保持良好的记录,以便于后续的质量追踪和问题解决。