adropin（AD）检测试剂盒使用说明

本试剂盒仅用于科学研究，严禁用于医学诊断。该试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）进行工作。

检测原理

在预涂有adropin（AD）抗体的微孔板中，逐步添加样本、标准品及HRP标记的检测抗体。经过温育和彻底洗涤后，加入TMB底物，在过氧化物酶的作用下，TMB先转变为蓝色，后在酸性环境中转化为黄色。反应颜色的深浅与样品中的adropin（AD）浓度成正比。

利用酶标仪在450nm波长下测定各孔的吸光度（OD值），以此计算样品的浓度。

样品收集与处理

1. 血清

使用不含热原和内毒素的试管，避免细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟，以分离血清和红细胞。

2. 血浆

使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝，3000转离心30分钟，提取上清。

3. 细胞上清液

进行3000转离心10分钟排除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆

将组织样本与生理盐水混合并捣碎，3000转离心10分钟以获取上清。

5. 样品保存

未及时检测的样本，建议分装以单次用量冷冻保存于-20℃，避免反复冻融。在室温下解冻前，应确保样品充分均匀。

实验耗材及设备

必要物品包括酶标仪（450nm）和高精度加样器（05-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL）。

试剂盒应在2-8℃保存使用前需室温平衡20分钟，使用前请充分摇匀所有液体组分。

操作步骤

1. 从铝箔袋中取出所需的微孔板，剩余部分应密封回到自封袋并储存于4℃。

2. 在标准品孔及样本孔中，标准品各加入不同浓度的50μL，样本孔中加入待测样本10μL及稀释液40μL，空白孔不加样本。

3. 加入HRP标记的检测抗体100μL，封板后在37℃孵育60分钟。

4. 移去孔内液体并重复洗涤5次。

5. 每孔加入底物A和B各50μL，避光条件下在37℃孵育15分钟后加入终止液50μL。

6. 在15分钟内通过酶标仪测定各孔OD值。

结果判断

在Excel中绘制标准曲线，以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，基于回归方程计算样本浓度。

试剂盒性能

本试剂盒的准确性、灵敏度和特异性经过严格验证，确保不与其他可溶性结构类似物交叉反应，并在试验中显示出良好的重复性。

人生就是博-尊龙凯时为您提供高质量的科研试剂，以支持您的研究工作。遵循说明书操作并确保样品收集的准确性，将有助于获得可靠的实验结果。

试剂盒仅供研究使用，禁止用于临床实验或人体实验，若违反使用规定，相关后果由实验者自行承担，人生就是博-尊龙凯时不承担任何责任。